Иммуногистохимия (ИГХ): что показывает и зачем нужна

Иммуногистохимия (ИГХ) окрашивает в клетках опухоли отдельные белки. По этой окраске уточняют тип опухоли и находят мишени для гормональной, таргетной и иммунотерапии.

В заключении после гистологии часто стоит фраза «рекомендовано ИГХ-исследование», а потом приходит второй документ с непонятными буквами: ER, PR, HER2, Ki-67, PD-L1. Пациенту кажется, что раз понадобилось ещё одно исследование, значит, с первым что-то пошло не так.

Обычно это не так. Иммуногистохимия отвечает на вопросы, на которые обычная окраска ответить не может, и для большинства опухолей без неё лечение сегодня не подбирают. Ниже я объясняю, как устроен метод, что он показывает и как его результат превращается в выбор лекарства.

Представьте, что в толпе нужно найти всех людей с определённым значком на одежде. Можно разглядывать каждого, а можно раздать всем, у кого есть значок, яркую шапку. Иммуногистохимия делает с клетками примерно то же самое.

На срез ткани наносят антитело, то есть белок, который узнаёт и связывает только одну молекулу, свою мишень. К антителу прикреплена метка, обычно фермент. Затем на стекло добавляют бесцветное вещество, хромоген, и фермент превращает его в коричневый осадок. Там, где белок-мишень есть, клетка окрашивается в коричневый цвет, а остальную ткань подкрашивают гематоксилином в голубой.

Исследование делают на тех же парафиновых блоках, что и обычную гистологию, поэтому новая биопсия, как правило, не нужна. Каждое антитело наносят на отдельный срез. Если врач просит проверить пять белков, лаборатория готовит пять отдельных стёкол.

От белка зависит и то, как записывают результат. Для рецепторов гормонов указывают процент окрашенных ядер, для HER2 ставят балл от 0 до 3+, для Ki-67 считают процент делящихся клеток, а для PD-L1 используют специальные шкалы. Поэтому одно и то же число в разных строках заключения означает разные вещи.

Под обычным микроскопом разные опухоли иногда выглядят почти одинаково. Например, низкодифференцированный рак, лимфома и саркома могут состоять из похожих мелких клеток, хотя лечат их совершенно по-разному. Каждая ткань вырабатывает свой набор белков, и иммуногистохимия позволяет его прочитать.

Обычно патоморфолог ставит сразу несколько антител, то есть панель. Белки эпителия укажут на рак, белки лимфоцитов на лимфому, белки мышечной или жировой ткани на саркому. Если в лимфоузле или печени нашли метастаз, а первичная опухоль неизвестна, панель ИГХ часто помогает понять, из какого органа она пришла.

Бывает, что даже после ИГХ происхождение опухоли остаётся неясным. Такие случаи врачи называют опухолью без выявленного первичного очага, и для них есть свои подходы к лечению.

Рецепторы эстрогена (ER) и прогестерона (PR) — это белки в ядре клетки, через которые на опухоль действуют женские половые гормоны. Если рецепторы есть, рост опухоли можно замедлить гормонотерапией, то есть препаратами, которые лишают опухоль гормонального сигнала. При раке молочной железы международные рекомендации считают опухоль ER-положительной, если окрашено от 1 % ядер и больше.

HER2 — белок на мембране клетки, который передаёт ей сигнал к росту. Результат ИГХ записывают баллами: 0, 1+, 2+ и 3+. Балл 3+ означает избыток белка, и тогда в лечение могут добавить препараты против HER2. Балл 2+ считают пограничным, и вопрос решает дополнительное исследование гена методом FISH.

HER2 смотрят не только при раке молочной железы, но и при раке желудка и некоторых других опухолях. Что означает каждый балл и какие вопросы задать врачу, мы подробно разбираем в справочнике заключений.

Чаще всего ИГХ идёт первой: она дешевле, быстрее и выполняется на том же стекле, на котором видна опухоль. Если результат пограничный, как HER2 2+, его уточняют методом FISH. А если нужно найти редкую мутацию, под которую есть таргетный препарат, делают NGS.

Правила проведения патологоанатомических исследований (приказ Минздрава России № 207н) отводят на исследование с иммуногистохимией до 7 рабочих дней, если маркеров не больше пяти, и до 15 рабочих дней, если их больше. Срок отсчитывают с поступления материала в лабораторию. Если блок нужно сначала забрать из другого архива, на это уйдут дополнительные дни.

Результат ИГХ зависит от того, как обращались с тканью с первых минут. Если кусочек долго лежал без формалина или, наоборот, слишком долго пробыл в нём, белки могут окраситься слабее, чем есть на самом деле. Поэтому международные рекомендации по HER2 и рецепторам гормонов отдельно оговаривают условия фиксации, а лаборатории участвуют в программах контроля качества.

Если результат ИГХ не совпадает с картиной болезни или лежит на границе, врач может предложить повторить исследование на другом блоке или пересмотреть стёкла в другой лаборатории. Для этого нужен материал из архива.